ICS 11. 220 B 41 中华人民共和国国家标准 GB/T 17999.7—2008 代替GB/T17999.6—1999 SPF 鸡 微生物学监测 第 7部分:SPF 鸡 胚敏感试验 SPF chicken—Microbiological surveillance- Part 7:Embryo susceptibility test for SPF chicken 2009-05-01实施 2008-12-31发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 17999.7—2008 前言 GB/T 17999《SPF鸡 微生物学监测》分为10个部分： 第1部分：SPF鸡 微生物学监测总则； 第2部分：SPF鸡 红细胞凝集抑制试验； 第3部分：SPF鸡 血清中和试验； 第4部分：SPF鸡 血清平板凝集试验； 第5部分：SPF鸡 琼脂扩散试验； 第6部分：SPF鸡 酶联免疫吸附试验； 第7部分：SPF鸡 胚敏感试验； 第8部分：SPF鸡 鸡白痢沙门氏菌检验； 第9部分：SPF鸡 试管凝集试验； 第10部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验。 本部分为GB/T17999的第7部分。 本部分代替GB/T17999.6—1999《SPF鸡） 胚敏感试验》。 本部分与GB/T17999.6—1999相比主要变化如下： 增加了资料性附录A“卵黄囊接种技术和EIDso测定方法”； 重新制定了试验成立条件和结果判定标准。 本部分的附录A为资料性附录。 本部分由中华人民共和国农业部提出。 本部分由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181）归口。 本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法 斯家禽有限公司。 本部分主要起草人：曲连东、刘家森、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、姜骞、司昌德、于海波、孟庆文。 本部分所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T17999.6—1999。 SAC GB/T17999.7—2008 SPF鸡微生物学监测 第7部分：SPF鸡胚敏感试验 1范围 GB/T17999的本部分规定了胚敏感试验的技术要求。 本部分适用于对SPF鸡进行禽脑脊髓炎病毒抗体的检测。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T17999的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本 部分。 GB/T17999.1一2008SPF鸡微生物学监测第1部分：SPF鸡微生物学监测总则 3原理 VanRoekel(CVCCAV35)毒株是禽脑脊髓炎病毒的一株胚适应毒株，具有高度嗜神经性。对无抗 体鸡群的鸡胚有致病性，引起肌肉营养不良、运动性降低、足趾卷曲等特征性病变。免疫或感染鸡群的 鸡胚对经卵黄囊接种的病毒有抵抗力。 4试剂和器材 4.1试剂 4.1.1AE-VanRoekel病毒（EIDso的测定参见附录A）。 4. 1. 2 SPF鸡蛋。 4.1.3被检蛋（取样比例见GB/T17999.1—2008）。 4.2器材 4.2.11mL注射器。 4.2.27号针头。 4.2.3恒温培养箱。 4.2.4超净工作台。 4.2.5小型孵化器。 5操作程序 5.1取被检蛋、标准SPF蛋孵至6日龄。 5.2取6日龄被检鸡胚，每胚经卵黄囊接种（接种方法参见附录A)0.2mL含100EID5。的AE-Van Roekel病毒液，接种完毕用蜡封孔，同时设6日龄SPF鸡胚接种病毒与不接种病毒分别作为标准阳性、 阴性对照。 5.3接种后的鸡胚，置于37℃C～37.5℃孵化器中孵化，每天照胚一次，取出死亡鸡胚，接种后第12d 取出全部鸡胚待检。 1