ICS 65.020 B16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3195—2018 热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程 橡胶树棒孢霉落叶病 Technical code of practice for resistance identification to diseases and insects of tropical crops germpalsm- Corynesporaleaf fall disease of rubber tree 行业标准信息服务平台 2018-03-15发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部 发布 NY/T3195—2018 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。 本标准由农业部农垦局提出。 本标准由农业部热带作物及制品标准化技术委员会归口。 本标准起草单位：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所。 本标准主要起草人：黄贵修、刘先宝、李博勋、时涛、李超萍、蔡吉苗、陈奕鹏、杨扬。 行业标准信息服务平台 NY/T3195—2018 热带作物种质资源抗病虫鉴定技术规程 橡胶树棒孢霉落叶病 1范围 本标准规定了橡胶树[Heveabrasiliensis（Willd.exA.Juss.）Muell.Arg.棒孢霉落叶病抗病性评 价的术语和定义、病原菌分离鉴定及接种体制备、抗病性鉴定、抗病性评价、抗病性评价有效性判定和结 果记录。 本标准适用于橡胶树棒孢霉落叶病抗病性品系筛 2规范性引用文件 RD 的引用入件 下列文件对于本 文件的# 应用是必不节 注日期 仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件其最新 版本（包括 NY/T 221 橡胶树栽培技 3术语和定义 S 下列术语和定 义适用 本文件 3. 1 Tall dise 由多主棒孢 Curt侵染引起的真菌 造成橡胶树的反 复落叶。橡胶树 奉孢霉 见附录A的A 3.2 多主棒孢毒 家 一类由多主 一 正的奇王 对答主 化性的多肽。 3.3 萎蕉指数 叶片萎為程度的数值 通过对植物叶 分 4病原菌分离鉴定及接种 中体制备 4.1病原菌分离鉴定 从发病植株上选取有典型病斑的叶片，用常规组织高法分离棒孢需落叶病病原菌，通过单孢分离 法对分离物进行纯化，经致病性测定后 菌株通过形态学（参见和ITS系统发育学分析确定为多主 棒抱菌，再用多主棒抱毒素的cas2亚型和 检测确定菌株的毒素类型（参见附录B）， 分别选择cas2亚型和cas5亚型的强致病力菌株用灭菌的超纯水保存备用。D 4.2病原菌菌饼接种体制备 将保存的cas2亚型和cas5亚型多主棒孢病菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上（平板直径 9cm），（28士1）℃恒温培养7d，用打孔器取菌落外缘的菌饼（直径5.0mm）作为接种体，对照则取同样 大小的空白PDA培养基。 4.3多主棒孢粗毒素提取液制备 4.3.1改良培养基 改良Fries3号培养基：蔗糖20.0g，酒石酸铵5.0g，KHzPO41.0g，NH,NO1.0g，MgSO 1.